Мужской фактор бесплодия и процедура ЭКО (ИКСИ, ПИКСИ)

Метод оплодотворения ПИКСИ при ЭКО

Содержание:

Вспомогательные репродуктивные технологии – это комплекс лечебных мероприятий, направленных на преодоление бесплодия, при котором отдельные или все этапы зачатия и раннего развития эмбрионов осуществляются вне организма женщины.

Эксперты ВОЗ в качестве причины бесплодия в 40% случаев указывают на мужской фактор. Значительный прогресс в лечении мужского бесплодия наметился в связи с внедрением в медицинскую практику метода интрацитоплазматической инъекции единичного сперматозоида в ооцит – ИКСИ.

По мере накопления и изучениярезультатов по программе ЭКО было выяснено, что так как при ИКСИ отсутствует естественный отбор, а селекция сперматозоидов производится только визуально по морфологическим признакам, участились случаи отторжения подсаженных в матку эмбрионов, что возможно связано с дефектами мужских половых клеток.

Важно. По данным Российской академии репродукции человека при ЭКО методом ИКСИ беременность наступала в 36,2%, а перинатальная патология в первом триместре (выкидыши, неразвивающаяся беременность) достигали 78,1% случаев.

Сущность метода ПИКСИ

При женском бесплодии, но хороших показателях спермограммы у мужчины процедура ЭКО выполняется по классической схеме: после проведения стимуляции яичников с целью получения как можно большего числа зрелых яйцеклеток, эмбриолог отбирает лучшие половые гаметы (мужские и женские) и помещает их в специальную питательную среду.

Процесс оплодотворения максимально приближен к естественному – сперматозоиды сами выбирают яйцеклетку, с помощью специальных рецепторов прикрепляются к ее поверхности, выделяя ферменты, растворяющие наружную защитную оболочку ооцита, проникают внутрь. Так же как в организме женщины, здесь запускаются биохимические процессы, препятствующие попаданию в яйцеклетку других сперматозоидов.

Положительное качество такого метода оплодотворения – этоучастие в процессе механизмов естественного отбора. То есть, яйцеклетка оплодотворяется самым активным и полноценным сперматозоидом.

К сожалению, эта методика работает только при наличии бесплодия со стороны женщины и при нормальных показателях спермы у мужчины.

Если после сдачи спермограммы, в ней обнаружатся патологические изменения, то проводить процедуру ЭКО возможно только с помощью ИКСИ или ПИКСИ.

Отклонения в спермограмме:

  • Тератозооспермия –пороки строения спермия: дефекты хвостика и головки.
  • Астенозооспермия – малая подвижность сперматозоидов в семенной жидкости.
  • Олигозооспермия – недостаточное количество гамет в эякуляте.

Задача искусственного оплодотворения – отбор лучших сперматозоидов, поскольку от этого зависит и положительный результат процедуры ЭКО, и нормальное развитие эмбриона в дальнейшем.

Для этой цели разработаны методы:

ИКСИ – интрацитоплазматическая инъекция сперматозоида в яйцеклетку. Эмбриолог сам по морфологическим признакам (структура, подвижность) под микроскопом выбирает полноценный сперматозоид. Далее проводится микроманипуляция – введение в яйцеклетку сперматозоида с помощью специальной иглы. Остальные этапы ЭКО проводят по стандартному протоколу.

ПИКСИ – это метод искусственного оплодотворения, при котором используется дополнительное тестирование мужских половых клеток для выявления наиболее сильного и жизнеспособного сперматозоида.

Метод ПИКСИ максимально приближен к естественному отбору спермиев, как это происходит в организме женщины. Отсюда и название метода –physiologicICSI, что в переводе с английского означает физиологическое ИКСИ.

Зрелая яйцеклетка окружена оболочкой, основным компонентом которой является гиалуроновая кислота. В естественных условиях только мужские гаметы, способные преодолеть этот барьер, могут оплодотворить яйцеклетку. Метод основан на селекции сперматозоидов, имеющих рецепторы к гиалуроновой кислоте.

Проведенные исследования показали, что сперматозоиды, которые фиксируются к веществу, состоящему из гиалуроновой кислоты – зрелые, имеют низкую степень фрагментации ДНК, то есть у плода вероятность развития генетических дефектов минимальная.

Важно. Сдачу биологического материала (спермы) для процедуры ЭКО производят только в условиях лаборатории методом мастурбации, после 2-3 дневного воздержания.

При непроходимости семявыносящих протоков сперму извлекают из придатка яичка, при помощи пунктирования.

В исключительных случаях при рубцовых изменениях семявыносящих протоков, или после операций, нарушающих проходимость семенных канальцев, выполняют микрохирургическую биопсию яичка.

Как происходит процесс ПИКСИ

Для отбора сперматозоидов используют стерильные чашки Петри, изготовленные специально для процедуры ПИКСИ.Материал чашек – полистерен – характеризуется повышенной прозрачностью, что необходимо при работе под микроскопом. Чашки изнутри покрываются слоем гиалуроновой кислоты, затемв них помещаюточищенные от семенной плазмы сперматозоиды.

Зрелые генетически полноценные гаметы, имеющие на поверхности рецепторы, чувствительные к гиалуроновой кислоте, сразу приклеиваются к стенке чашки. Незрелые, неполноценные спермии без рецепторов продолжают активно двигаться.

Выбранный сперматозоид аспирируется специальной иглой, затем оболочка яйцеклетки прокалывается и спермий попадает внутрь цитоплазмы ооцита. Происходит слияние мужской и женской хромосом, запускается новая генетическая программа – развитие зародыша.

Далее процедуры ИКСИ и ПИКСИ протекают одинаково. Оплодотворенные яйцеклетки отмываются, помещаются в питательный раствор и дальнейшее развитие происходит в инкубаторе. Прокол яйцеклетки не опасен для дальнейшего развития эмбриона. Оболочка ооцита настолько эластичная, что место пункции сразу затягивается. Культивация оплодотворенного ооцита в инкубаторе продолжается 3-5 дней.

После изучения дефектные эмбрионы отбраковываются, а нормально развивающиеся – правильной формы, размера, с равномерным делением, без посторонних включений – переносятся в полость матки. Для увеличения шансов благополучной имплантации зародышей в матку подсаживают 2-3 эмбриона.

Полезный совет. Если у мужчины имеются нарушения в составе и структуре сперматозоидов, целесообразно сразу при вступлении в программу ЭКО совместить ее с ПИКСИ. Это значительно увеличит шанс женщине забеременеть с первой попытки.

Преимущество метода ПИКСИ

Главное достоинство метода заключается в том, что селекция (отбор) сперматозоидов происходит не субъективно, как при ИКСИ и зависит в большей степени от опыта и квалификации врача, а с помощью объективного теста, который отсеивает низкокачественные спермии, не давая им возможности участвовать в оплодотворении яйцеклетки. Использование метода увеличивает вероятность благополучного зачатия.

  • Метод позволяет оценивать не только качество сперматозоидов, но и степень зрелости и свойства ооцитов.
  • Нет риска бактериального обсеменения питательной среды, в которой находятся ооциты со сперматозоидами в случае неожиданной острой инфекции, что возможно при обычной процедуре ЭКО.
  • Существенно увеличиваются шансы наступления беременности.
  • Снижается риск рождения ребенка с хромосомными или генными аномалиями.
  • Повышаются шансы благополучного вынашивания и рождения ребенка.

Интересно. При использовании методики ПИКСИпроцедуры ЭКО беременность наступает в 60% случаев, что почти в два раза превышает показатели при выполнении стандартного протокола ЭКО.

Показания

  • Незначительный процент оплодотворения при ИКСИ.
  • Слабое развитие эмбриона.
  • Бесплодие неясного генеза.
  • Ограниченное количество ооцитов – получение 4 и менее яйцеклеток при стимуляции овуляции.
  • Возраст женщины – более 35 лет.
  • Наличие хромосомных патологий.
  • Высокий – более 15% – уровень ДНК-фрагментации сперматозоидов.
  • Повышенная концентрация патологических сперматозоидов.
  • Привычные выкидыши.
  • Положительный MAR- тест >50% сперматозоидов, покрытых антителами (при иммунном бесплодии).
  • Травмы позвоночника – органическая спинальная импотенция.
  • При низких показателях НВА-теста (определение зрелости сперматозоида).

Важно. При полном отсутствии выработки сперматозоидов в яичках или при онкологии у мужчины в программе ЭКО может быть использована донорская сперма.

Противопоказания

Безусловными противопоказаниями к самой процедуре ЭКО с применениемлюбых модификаций, в том числе и ПИКСИ, являются состояния женщин, не позволяющие ей выносить и родить здорового ребенка, а также риск негативного влияния самой беременности на здоровье женщины.

Абсолютные противопоказания:

  • Злокачественные новообразования любой локализации, в том числе в анамнезе.
  • Аномалии развития половых органов женщины, препятствующие вынашиванию плода.
  • Тяжелые соматические патологии, при которых наступление беременности может усугубить течение болезни и даже угрожать жизни женщины.
  • Психические расстройства.

Относительные противопоказания

К ним относятся временные расстройства здоровья, которые не позволяют в данный момент выполнить ЭКО-процедуру. После успешно проведенного лечения и стабилизации состояния можно приступить к реализации программы.

Относительные противопоказания со стороны женщин:

  • Острые инфекционные и обострение хронических заболеваний: ОРЗ, туберкулез, гепатиты, сифилис, ВИЧ.
  • Острые воспалительные процессы в организме.
  • Доброкачественные опухоли матки и яичников: полипы, кисты, миомы.
  • Состояния после перенесенных операций, травм.
  • Обострения любых соматических болезней: язва желудка, бронхит.

Относительны противопоказания со стороны мужчин:

  • Генетически обусловленные заболевания с высоким риском передачи ребенку.
  • Половые инфекции.
  • Азооспермия – полное отсутствие сперматозоидов в полученном эякуляте.

Важно. Оплодотворение яйцеклетки незрелым сперматозоидом увеличивает риск хромосомных аномалий эмбриона.

Недостатки метода

Использование метода ПИКСИ не оказывает негативного влияния на дальнейшее развитие эмбриона.

К относительным недостаткам программы ЭКО вместе с модификацией ПИКСИ можно отнести увеличение стоимости процедуры. Учитывая уникальность оборудования, ювелирную работу эмбриологов, а также повышенный процент успешной беременности, даже с первой попытки по сравнению с другими методами, возможно это приведет к экономии на последующих ЭКО.

Отличия ПИКСИ от ИКСИ

Обе эти методики и ИКСИ, и ПИКСИ, используемые в ходе проведения экстракорпорального оплодотворения, являются действенными способами устранения мужского бесплодия.

Метод ИКСИ помогает справиться с мужским бесплодием при снижении концентрации и количества подвижных сперматозоидов при их нормальном морфологическом строении. Но если мужской фактор бесплодия обусловлен патологическим изменениями самой структуры половой клетки (тератозооспермия), то, как правило, эта процедура не заканчивается успехом – даже если произошло зачатие, эмбрион, унаследовавший дефектный генетический материал, не приживается в матке, и происходит выкидыш.

Даже ультрасовременный световой микроскоп с 400-кратным увеличением не может обнаружить микроструктурные изменения в сперматозоиде. Поэтому и был разработан метод ПИКСИ, основанный на способности связываться с гиалуроновой кислотой только зрелых и жизнеспособных спермиев.

В методе ПИКСИ помимо подвижности и правильной морфологической структуры сперматозоида оценивается их способность взаимодействовать с гиалуроновой кислотой, которая является составной частью внешней оболочки яйцеклетки. В передней части головки сперматозоида находится органоид –акросома с ферментом гиалуронизазой, способной растворить мембрану клетки ооцита и проникнуть внутрь. В природных условиях это удается сделать самому жизнеспособному и быстрому сперматозоиду.

Создавая условия, свойственные при естественном оплодотворении (нанесение на стенки чашки Петри гиалуроновой кислоты) производится отбор наиболее активных спермиев, которые реагируют на гиалуроновую кислоту. Считается, что именно такие мужские половые клетки – носители нормальной генетической информации.

Важно. При мужском факторе бесплодия применение метода ПИКСИ по сравнению с ИКСИ частота наступления беременности возрастает практически в два раза.

Выводы

Выбор дополнительных методик (ИКСИ, ПИКСИ) экстракорпорального оплодотворения, повышающих эффективность процедуры, очень сложен и зависит от многих факторов, учитывающих показания, противопоказания, частоту предыдущих неудачных попыток забеременеть с помощью ЭКО.

Считается доказанным более высокий эффект применения ПИКСИ по сравнению с ИКСИ при повторных попытках, но ввиду относительного недавнего использования метода на практике он требует дальнейшего изучения и статистического подтверждения.

ЭКО при мужском бесплодии

Наша клиника успешно применяет ЭКО при мужском бесплодии с помощью различных современных методик.

Читайте также:  Народные средства от синдрома истощения яичников (СИЯ): витамине Е, лецитин и травяные настои

Экстракорпоральное оплодотворение делает возможным оплодотворение яйцеклетки при наличии хотя бы одного живого сперматозоида в эякуляте мужчины.

Одним из самых частых проявлений бесплодия у мужчин является низкое качество спермы. Малое количество сперматозоидов в эякуляте или слабая их подвижность, наличие сперматозоидов с плохой морфологией – всё это является причинами мужского бесплодия и делает невозможным зачатие ребёнка естественным путём.

Для улучшения качества спермы перед ЭКО мы применяем индивидуальную стимуляцию сперматогенеза. Стимуляция сперматогенеза – это курс лекарственной терапии, направленный на временное улучшение показателей спермы.

В случаях, когда в эякуляте нет живых и подвижных сперматозоидов (азооспермия), то их можно извлечь непосредственно из ткани яичка методом биопсии TESA, microTESE. Такие сперматозоиды также способны к оплодотворению при ЭКО.

Все полученные сперматозоиды подготавливаются специальным образом в эмбриологической лаборатории и криоконсервируются на хранение.

После обязательного обследования супруга вступает в программу ЭКО.

В назначенный день ей проводится пункция фолликулов для извлечения зрелых яйцеклеток. Все полученные яйцеклетки в этот же день оплодотворяются сперматозоидами супруга в условиях эмбриологической лаборатории методом ИКСИ. Из полученных эмбрионов отбираются 1-2 лучших и через несколько дней переносятся в матку женщины. Остальные криоконсервируются. В среднем успех от процедуры достигается за 2-3 полных цикла ЭКО.

Особенности ЭКО (ИКСИ) при мужском факторе бесплодия

Для оплодотворения яйцеклетки при низких показателях спермы лучшим методом является ИКСИ (интраплазматическая инъекция сперматозоида в яйцеклетку). Применение этого метода значительно повышает шансы на успех, чем при обычном ЭКО, когда сперматозоиды просто помещаются в «пробирку» к яйцеклетке. Такая процедура искусственного оплодотворения сегодня является основным методом лечения бесплодия при неспособности мужчины к зачатию.

Результативность оплодотворения при ИКСИ в нашей клинике достигает 90%.

При ИКСИ эмбриолог самостоятельно отбирает наиболее перспективный сперматозоид и с помощью специальных инструментов погружает его в яйцеклетку. Таким образом «помогая» сперматозоиду проникнуть внутрь клетки. Весь процесс оплодотворения происходит под контролем врача эмбриолога.

Одна из разновидностей метода ИКСИ – это ПИКСИ.

Его применяют для более тщательного отбора наиболее фертильных сперматозоидов. При ПИКСИ сперматозоиды погружаются в специальную среду с гиалуроном. В естественных условиях это вещество находится в слое клеток, окружающих созревшую яйцеклетку. Сперматозоиды, способные к оплодотворению, вступает с помощью своих рецепторов в контакт с гиалуроновой кислотой.

У таких сперматозоидов реже бывают хромосомные аномалии и лучшая интеграция ДНК. Таким образом происходит отбор. Сперматозоиды, не способные к оплодотворению, не содержат рецепторы к гиалурону. Для последующей процедуры ИКСИ они не используются.

Показания к ЭКО при мужском факторе бесплодия

  • Идиопатическое бесплодие (бесплодие неясного генеза);
  • Наличие дефектов спермы у супруга по данным спермограммы (низкое количеств – олигозооспермия, мало подвижных сперматозоидов – астенозооспермия, их сочетание – олигоастенозооспермия);
  • Большое количество дефективных (патологических) сперматозоидов в эякуляте (тератозооспермия);
  • Наличие антиспермальных антител (АСАТ) в эякуляте;
  • Отсутствие сперматозоидов в эякуляте (азооспермия).

Во всех случаях, когда лечение мужского бесплодия затруднительно, занимает длительное время или вовсе невозможно, специалисты «ВитроКлиник», применяя все самые современные методики зачатия, добиваются получения нормальной беременности и рождения здорового малыша.

Вебинар на тему: “Как повысить шансы на благополучное ЭКО при мужском факторе бесплодия”


Процедура ПИКСИ: особенности оплодотворения

При искусственном оплодотворении методом ПИКСИ производится отбор самых лучших сперматозоидов для последующего оплодотворения яйцеклетки. Эта процедура очень важна, ведь от успешного отбора зависит последующее успешное развитие здорового эмбриона.

Когда нужно делать ПИКСИ?

Метод ПИКСИ для ЭКО используется при мужском бесплодии. Репродуктолог-эмбриолог отбирает самый качественный и наиболее подвижный сперматозоид. После, этот сперматозоид будет введен в яйцеклетку при помощи очень тонкой хирургической иглы. Таким образом, можно создать эмбрион искусственно и позже подсадить его будущей матери.

Ввод сперматозоида в яйцеклетку (оплодотворение) с помощью сверхтонкой стеклянной иглы

Для назначения такой процедуры нужно пройти специальное генетическое обследование. По результатам анализа спермы (спермограммы) доктор принимает решение о ПИКСИ если:

  1. В сперме нет зрелых сперматозоидов.
  2. При низкой подвижности сперматозоидов.
  3. При наличии олигозооспермии.
  4. Если присутствуют антиспермальные антитела.
  5. В случае с криопереносом если после размораживания качество сперматозоидов понизилось.
  6. Если число единиц с нормальной морфологией небольшое.

Метод ПИКСИ может быть использован после ранее неудачных попыток обычного ЭКО.

Такой метод отбора сперматозоидов, применяемый для последующего оплодотворения яйцеклетки при помощи специальной иглы, позволяет избежать проблем с будущим здоровьем ребенка. Будет отобран только самый лучший сперматозоид, без отклонений. Таким образом можно предотвратить возможные генетические отклонения, предрасположенность к различным заболеваниям и т.д. Не нужно бояться ПИКСИ.

Как проводится процедура?

ПИКСИ повторяет естественный процесс оплодотворения, как это предусмотрено природой. Естественность процедуры и лучший сперматозоид дают результат. Для ПИКСИ метода применяют две емкости небольшого объема. Поверхность этих специальных чашек обрабатывают гиалуроновой кислотой. Эта среда оказывается максимально приближенной к реальным условиям внутри организма. Гиалуроновая кислота в женском организме отсеивает слабые сперматозоиды. Непригодные сперматозоиды очень чувствительны к такой кислоте.

Отбор сперматозоидов по технологии ПИКСИ с гиалуроновой кислотой

Сперматозоиды, выбранные методом ПИКСИ, отличаются наилучшей наследственностью из-за того, что они несут в себе качественный наследственный материал.

Гиалуроновая кислота в чашке отсеивает плохие сперматозоиды. При контакте с кислотой они просто перестают двигаться, происходит естественный отбор. ПИКСИ это большое достижение в новейшей медицине. До изобретения этого метода определить качество сперматозоида было нельзя. Оплодотворение яйцеклетки после появления ПИКСИ можно гарантировать, раньше такого не было.

Три метода и их различия

Первый метод, применяемый при ЭКО который мы рассмотрим, это ИКСИ (от англ. Intra Cytoplasmic Sperm Injection). Дословный перевод на русский означает введение сперматозоида в цитоплазму (ред. яйцеклетки). Давайте разберемся, как делают ИКСИ.

При процедуре ИКСИ используют микроскопы с очень большим увеличением. Визуально отбирается наиболее подходящий сперматозоид. Такой способ подойдет в случае с очень плохой спермой. ИКСИ это один из методов оплодотворения я при ЭКО. Этот метод отличается от других тем, что сначала отбирается лучший сперматозоид и вводится в яйцеклетку искусственно. Это полный контроль над зачатием.

Оплодотворение (ввод сперматозоида) методами ПИКСИ, ИМСИ и ИКСИ. Способ непосредственно оплодотворения яйцеклетки у всех этих методов одинаков.

ПИКСИ – эта процедура похожа на ИКСИ. Одно отличие от ИКСИ это помещение сперматозоидов после отбора в специальную среду, имитирующую среду матки. После, с помощью специальной иглы, самый лучший сперматозоид вводится в яйцеклетку, происходит оплодотворение. При этом способе отбора сперматозоидов риск хромосомных нарушений, которые может унаследовать ребенок, минимальный или равен нулю. Вот чем отличается ИКСИ от ПИКСИ.

Обязательно посмотрите это видео в котором показано, как отбирают лучший сперматозоид и вводят в яйцеклетку, действительно интересно:

Еще один метод это ИМСИ. Данный метод предусматривает отбор сперматозоидов по морфологическим критериям. Этот метод более точный, чем остальные. При ИМСИ используют самое высококлассное оборудование, включая самые мощные микроскопы. Эти микроскопы могут произвести увеличение в 7000 раз. Например, при ИКСИ производится увеличение всего в 400 раз. Соответственно при ИМСИ можно увидеть у сперматозоидов любые отклонения и дефекты.

Теперь вы знаете, чем отличается ИКСИ от ПИКСИ и что такое ИМСИ. Особых различий по способу оплодотворения яйцеклетки у этих методик нет. Отличается лишь способ отбора сперматозоидов. ПИКСИ процедура при ЭКО наиболее распространа из-за простоты отбора сперматозоидов.

Противопоказания

Противопоказания для проведения таких процедур в процессе ЭКО несколько:

  • онкология;
  • психологические расстройства;
  • доброкачественные образования в матке или в области яичников.

Краткий итог

При ИКСИ отсеивание и отбор хороших сперматозоидов производится визуально и субъективно. Качество сперматозоидов оценивается по их внешнему виду, а потом лучший из них с помощью прокола попадает в яйцеклетку. Процедура ПИКСИ подразумевает более глубокий анализ. После внешней оценки и отбор сперматозоиды помещаются в среду похожую на внутриматочную. Так осуществляется дополнительный отбор. Если сперматозоид выжил после контакта с гиалуроновой кислотой, значит и прижиться к матке сможет.

Все эти методы отбора и оплодотворения существенно улучшают прогноз по наступлению и протеканию беременности при ЭКО. Риск выкидыша, а также других возможных и опасных последствий сокращается. Статистика показывает успешность этих технологии. Эти методики уже давно зарекомендовали себя, как надежные и проверенные временем.

ИКСИ-ПИКСИ и другие репродуктивные технологии при мужском бесплодии

Даже те, кто не планирует беременность при помощи экстракорпорального оплодотворения, знают, как работает эта технология: яйцеклетку извлекают из яичника женщины, помещают в сосуд со спермой отца, а затем, оплодотворенную, подсаживают в матку будущей мамы. могут забеременеть женщины, у которых, например, нарушена проходимость маточных труб (или они вовсе удалены).

Но что делать, если проблемы есть и у отца? Тогда на помощь приходят современные репродуктивные технологии, включающие инъекцию сперматозоида в яйцеклетку. Что это и как это работает?

«Плохая» сперма

По статистике, до 40% всех случаев бесплодия в парах происходит по вине мужчины. Иногда причина бесплодия кроется в низком качестве спермы, что можно определить при помощи спермограммы.

Патологические состояния, которые можно выявить при помощи спермограммы (патоспермии)

Олигоспермия (гипоспермия) – недостаточный объём эякулята (менее 2 мл).

Олигозооспермия – низкая концентрация сперматозоидов в сперме.

Астенозооспермия – низкий процент активно подвижных сперматозоидов.

Тератозооспермия – низкий процент морфологически нормальных сперматозоидов, много аномальных форм (например, две головки или два жгутика).

Акинозооспермия – все сперматозоиды в эякуляте неподвижные;

Некрозоосперия – все сперматозоиды в эякуляте мертвые.

Азооспермия – отсутствие сперматозоидов в сперме.

Еще одна причина, по которой сперматозоиды «объявляют забастовку) – высокое содержание антиспермальные антител, либо в самой сперме, либо в цервикальной слизи у женщины. Такая среда буквально «тормозит» движение даже здоровых и активных сперматозоидов, которые не в состоянии добраться до полости матки и маточной трубы.

” Решение напрашивается само собой – отнестись к сперматозоиду так же деликатно и бережно, как к яйцеклетке: извлечь из общей массы самого здорового, подвижного и крепкого кандидата и бережно внедрить его в яйцеклетку. Именно так и работают инъекционные технологии!

Однако за этим упрощенным объяснением стоит целая серия современных технологий с названиями, напоминающими детскую считалочку: ИКСИ, ИМСИ, ПИКСИ… чем они отличаются и какой из них лучше?

Читайте также:  Женское бесплодие: причины, факторы, признаки, диагностика

ИКСИ – интрацитоплазматическая инъекция сперматозоида

ИКСИ – базовый метод, практически так же популярный, как и само ЭКО. Проводят процедуру следующим образом.

Репродуктолог при помощи микроскопа исследует сперму будущего папы. В общей массе определяет «лучшего из лучших» – находит активный крупный сперматозоид, у которого не заметно никаких повреждений.

Далее при помощи специальных манипуляторов начинается процедура внедрения сперматозоида. Микроиглой ему перебивают хвостик, таким образом обездвиживая его, затем втягивают в стеклянную микроиглу.

Подготовленная к процедуре яйцеклетка (зрелая и очищенная от кумулюса – окружающих клеток) удерживается присоской-микропипеткой. Дальше микроигла вводится в яйцеклетку и через 16-18 часов уже можно оценить, произошло оплодотворение или нет.

” Некоторые клиники оценивают процент успешного оплодотворения при помощи метода ИКСИ в 95%, однако, на деле следует ориентироваться на нижнюю границу 30%, которую указывает большинство уважаемых медицинских учреждений.

ИМСИ – интраплазматическая инъекция морфологически отобранного сперматозоида

При использовании методе ИКСИ репродуктолог рассматривает сперматозоиды под микроскопом с увеличением в 400 раз. Но можно использовать и гораздо более мощные микроскопы, с увеличением до 6 тысяч раз! При таком увеличении каждый спермий можно рассмотреть буквально в лицо. А это очень важно, ведь неполноценность сперматозоида напрямую отражается на его «внешности».

В отличие от ИКСИ здесь репродуктологу предстоит намного более кропотливая и длительная (порой многочасовая) работа по выбору того самого, единственного. Но и результат того стоит.

ИМСИ на 35% эффективнее ИКСИ. Что это значит? Если, к примеру, у 100 пар после двух процедур ИКСИ оплодотворение не наступает, у 35 из них беременность возможна после проведения ИМСИ.

ПИКСИ – физиологическая интрацитоплазматическая инъекция сперматозоидов

Сперматозоид должен быть не только «здоровым», он должен еще и «дозреть» до оплодотворения! Но на глаз определить зрелость сперматозоида невозможно. Для этого проверяют. Как он взаимодействует с гиалуроновой кислотой.

Чтобы понять, зачем это делают, рассмотрим механизм естественного оплодотворения. Все знают, что спермий проникает сквозь оболочку яйцеклетки, но как он это делает? Для проникновения в яйцеклетку на головке зрелого сперматозоида есть мембранный пузырек – акросома. При столкновении двух клеток из акросомы высвобождается фермент гиалуронидаза, растворяющий внешнюю оболочку яйцеклетки. Очевидно, что если у сперматозоида нет полноценной работающей акросомы, он не пригоден для оплодотворения.

При исследовании «в пробирке» эту ситуации имитируют при помощи капель гиалуроновой кислоты. Из сперматозоидов, которые начали взаимодействовать с кислотой, отбирают самого зрелого, с наилучшим строением, и используют его для оплодотворения.

Метод ПИКСИ относительно нов (по сравнению с ИКСИ, впервые проведенном в 1992 году, и ИМСИ – в 1999). Относительно его эффективности до сих пор ведутся споры: одни специалисты утверждают, что он как минимум на 10% увеличивает вероятность оплодотворения по сравнению с визуальными способами отбора сперматозоида. Другие клиники (не практикующие этот метод) уверяют, что это не более чем коммерческий ход конкурентов.

Однако есть данные, что число выкидышей и замерших беременностей при использовании метода ПИКСИ втрое ниже, чем при использовании обычного ИКСИ.

Нужно отметить, что, несмотря на сложность и кажущуюся «неестественность» процедуры, на самом деле она достаточно физиологична и близка к тому, что происходит при обычном зачатии. Дети, рожденные после процедуры ИКСИ, ничем не отличаются от сверстников, появившихся на свет без помощи репродуктологов. Так что не беспокойтесь за здоровье ребенка, если беременность наступила. Просто примите наши пожелания успешных родов и счастливого материнства!

Показания и процедура ЭКО при мужском бесплодии

Эстракорпоральное оплодотворение — одна из вспомогательных репродуктивных технологий, которые применяются при бесплодии, в том числе и мужском. При ЭКО яйцеклетку оплодотворяют искусственно, в лабораторных условиях.

Как проходит ЭКО

Основные процедуры проходят женщины. С помощью тонкой иглы через влагалище у женщины забирают фолликулы — пузырьки, в которых образуются яйцеклетки. Для точности пункция проходит под контролем УЗИ, процедуру проводят под общей анестезией.

В этот же день яйцеклетку смешивают с отмытыми от семенной жидкости сперматозоидами. За сутки они должны преодолеть мембрану яйцеклетки и оплодотворить её. К пятому дню культивации эмбрион уже имеет 8 клеток. В лаборатории выделяют качественные эмбрионы и имплантируют их в полость матки. Спустя несколько дней гормонального курса женщина проходит тест на беременность.

ЭКО при мужском бесплодии

Мужской фактор бесплодия доходит до 50% в бесплодных парах. Его диагностируют, если в течение года при регулярном сексе без предохранения не получается завести ребенка.

Для оценки качества спермы, в том числе и при проблемах с женской репродуктивной системой, мужчине назначают спермограмму. Это микроскопический анализ эякулята, который определяет качество спермы. Он помогает оценить главные характеристики спермы — количество живых сперматозоидов, их строение и подвижность.

Врачи могут назначить дополнительные тесты. Среди них — ПЦР-анализ, который находит ДНК инфекций в сперме, и MAR-тест, выявляющий антиспермальные антитела.

Если показатели в норме, в день забора у женщины фолликулов мужчину просят помастурбировать. Для ЭКО необходима свежая сперма. Если сдать ее в день процедуры не получается, сперму забирают заранее и замораживают.

При низких показателях спермы применяют усовершенствованный вариант ЭКО — интраплазматическую инъекцию сперматозоида в яйцеклетку (ИКСИ). При ЭКО сперматозоиды просто помещают в пробирку к яйцеклетке и ждут, когда они оплодотворят её. При ИКСИ из спермы выбирают одну мужскую клетку, которая наиболее подходит для оплодотворения, и с помощью иглы вводят сперматозоид в яйцеклетку.

Для этой процедуры нужен только один живой и здоровый сперматозоид. Его могут взять напрямую из яичка. В этом случае проводится биопсия.

Если в мужском организме сперматозоиды не вырабатываются вовсе, используют донорскую сперму.

Когда применяется ЭКО при мужском бесплодии

ЭКО используют тогда, когда вылечить бесплодие не получается более традиционными методами — гормональной терапией, противовирусными препаратами или хирургическим вмешательством.

Также экстракорпоральное оплодотворение применяют в тех случаях, когда вероятность зачатия после ЭКО выше, чем после сложного лечения.

Показаниями к ЭКО при мужском факторе бесплодия является и идиопатическое бесплодие. Этот диагноз ставят, когда выявить причины заболевания не удалось.

Методы искусственного оплодотворения используют, когда не дало результатов лечение тяжелых стадий патологий спермы. К ним относят низкое количество сперматозоидов (олигозооспермия), низкое количество подвижных половых клеток (астенозооспермия), нарушения их морфологии (тератозооспермия) и их сочетание. Также ЭКО применяют, когда в сперме вовсе отсутствуют сперматозоиды.

Противопоказаний к ЭКО со стороны мужчин нет. Процедуру не рекомендуется проводить, если у женщины обнаружены и не вылечены:

  • деформации, при которых невозможна имплантация;
  • опухоли половых органов;
  • острые воспаления;
  • соматические и психические заболевания.

Статистика ЭКО в России

Впервые ЭКО провели в 1977 году. С тех пор успешность метода ежегодно росла. По словам министра здравоохранения России Вероники Скворцовой, сейчас каждая третья процедура ЭКО в стране заканчивается беременностью.

В 2016 году эффективность ЭКО выросла на 40%, а всего проведено 116 тысяч циклов экстракорпорального оплодотворения. Благодаря предимплантационной генетической диагностике почти все родившиеся дети не имеют патологий.

Эффективность ЭКО повышается с каждым новым циклом. Также успешность ЭКО сильно варьируется от клиники, возраста и наличия наследственных заболеваний у женщины, причин бесплодия и образа жизни обоих партнёров.

Мужчинам для повышения качества спермы рекомендуется ограничить себя в употреблении алкоголя, бросить курить, больше двигаться и правильно питаться.

ИКСИ ПИКСИ, или Как стать папой

В последние десятилетия отцовскому фактору в зачатии in vitro уделяется повышенное внимание. Успехи биотехнологии ИКСИ внушили уверенность в репродуктивных силах миллионам мужчин, считавшимся бесплодными. Следующим шагом на этом пути стала методика ИКСИ ПИКСИ. Положенный в ее основу биохимический анализ сперматозоидов увеличивает шансы забеременеть при проблемах с мужской фертильностью и гарантирует отсутствие генетических отклонений у потомства.

Роль ИКСИ в ЭКО-протоколе

Стандартная процедура экстракорпорального оплодотворения предполагает последовательное прохождение бесплодной парой следующих стадий лечения:

  • стимуляцию овуляции;
  • сбор материнских и отцовских гамет;
  • зачатие “в пробирке”;
  • перенос в матку выращенного в специальной культуре эмбриона.
  • Однако не всем пациенткам, несмотря на множественные попытки, удается забеременеть ЭКО-способом. У 20 % пар диагностируется бесплодие без конкретных причин. Растет роль мужского фактора в случаях неудачного оплодотворения. Одной из тревожных тенденций является низкий имплантируемый потенциал эмбриона, ведущий к частым выкидышам.

    Значительным технологическим прорывом в сфере репродукции человека стала методика ИКСИ (интрацитоплазматическое впрыскивание сперматозоида). Апробированная в начале 1990-х годов, в третьем тысячелетии она была введена в клиническую практику по всему миру. Согласно данным национальных и региональных центров репродуктологии, использование ЭКО ИКСИ увеличилось с 39,6% циклов в 1997 году до 58,9% в 2004 году.

    Для многих семейных пар, относящихся к категории бесплодных по мужскому фактору, процедура ICSI стала панацеей. Она позволила отчаявшимся было супругам отбросить идею донорства. Новаторское значение этой методики заключалось в обеспечении контролируемости процесса оплодотворения (спонтанного в традиционном ЭКО):

  • денудации ооцитов;
  • селекции сперматоцитов путем визуальной оценки с привлечением мощной оптической техники;
  • впрыскивании в цитоплазму каждого ооцита селектированного спермия.
  • Выполнение ICSI

    Процедура начинается в эмбриологической лаборатории. Здесь из образца спермы отбираются наиболее зрелые клетки. Форма и размер – определяющие параметры селекции.
    Тем временем ооциты обрабатываются гиалуронидазой – органической кислотой, расщепляющей защитные мембранные слои, подготавливая тем самым почву для дальнейших манипуляций.

    В основной, инъекционной, части процедуры можно выделить следующие этапы:

    1. Абсорбирование зрелого ооцита (заранее обработанного реактивом, растворяющим защитные мембранные слои) специальной микропипеткой.
    2. Использование микроиглы для иммобилизации и захвата одного сперматозоида.
    3. Впрыскивание сперматозоида в цитоплазму ооцита с помощью микроиглы с последующим извлечением инструмента.
    4. Проверка яйцеклеток на наличие признаков оплодотворения (на следующий день).
    5. Пересадка в матку оплодотворенной и приступившей к делению зиготы.

    После процедуры ИКСИ, согласно обычному ЭКО-протоколу, проводят подготовку эндометрия для лучшего закрепления эмбриона.

    Кому поможет ICSI

    Процедура ИКСИ предлагается при установлении патологических изменений в репродуктивной сфере мужчины:

  • неспособности эякулята к оплодотворению, зафиксированной в предыдущих циклах ЭКО-лечения;
  • выраженных аномалиях спермы;
  • Читайте также:  Как понизить пролактин у мужчин: народными средствами и медикаментозно
  • отсутствии или обструкции семяизвергательного канала;
  • неудачной реверсивной вазэктомии;
  • травмах спинного мозга;
  • недостаточности гипофиза.
  • ИКСИ используется и для борьбы с женским бесплодием, когда в яичниках производится недостаточное количество ооцитов либо они низкого качества.

    ПИКСИ – технологическое усовершенствование ИКСИ

    Хотя ICSI сыграло подвижническую роль во многих циклах ЭКО, со временем потребовалось усовершенствование этой методики. Визуальный анализ спермы в клинической практике проявил не только сильные, но и слабые стороны:

  • производящий впечатление нормального и здорового сперматозоид может оказаться репродуктивно несостоятельным в момент оплодотворения;
  • физиологическая незрелость мужской гаметы может привести к низкому качеству эмбриона, что чревато ранней потерей беременности;
  • невозможность визуально определить повреждение ДНК-цепочки в отцовской половой клетке способна обернуться хромосомными патологиями у плода.
  • Эти риски заставили исследователей заняться разработкой нового, более точного и надежного метода отбора сперматозоидов. Он был назван английской аббревиатурой PICSI, образованной от ICSI путем добавления начальной буквы “P”, означающей “physiological”. Таким образом, PICSI представляет собой усовершенствованный метод ICSI, с физиологическим – приближенным к естественному – подходом к селекции сперматоцитов.

    Использование в PICSI биомеханизма сперматогенеза

    Попробуем разобраться в ноу-хау под названием ПИКСИ – что это и как делается? Метод основан на природной способности мужских гамет связываться с важнейшим компонентом микроокружения яйцеклетки – гиалуронатом.

    Этот гетерополисахарид входит в состав клеток кумулюса, в кольце которых находится ооцит. Чтобы сперматозоид проник сквозь этот барьер и оплодотворил яйцеклетку, ему приходится вступить в контакт с гиалуронатом через мембранные рецепторы. Наличие рецепторов, чувствительных к гиалуронату, – показатель истинной, функциональной, зрелости сперматозоида.

    Только такая биохимически полноценная мужская гамета обладает фертильной компетентностью. Исследования показали наличие у нее комплекса конкурентных достоинств:

  • лучшей морфологии;
  • меньшей доли хромосомных аномалий (мутаций, анеуплоидии);
  • более высокого индекса целостности ДНК.
  • Целью метода PISCI является селекция функционально зрелых сперматозоидов. Ведь именно низкое их качество становится причиной неоднократных неудач в ЭКО-терапии. Когда эмбриологи оценивают сперматозоиды “на глазок”, учитывая лишь критерии подвижности и формы, такие дефекты, как хромосомные мутации, повреждение ДНК или физиологическая несформированность, могут быть не обнаружены. Вот почему при подозрении на хромосомную анеуплоидию или установление критического показателя фрагментации ДНК рекомендуется прохождение PICSI.

    Этот метод с дополнительной опцией является технологически “продвинутым” ИКСИ. Он обеспечивает более надежное тестирование спермы, чем оказывает неоценимую услугу как врачам, так и пациентам.

    История исследований

    Метод ПИКСИ был разработан в лаборатории репродуктивного центра Йельского университета под руководством ее директора – доктора Габора Хусара (Gabor Huszar). С середины 1990-х годов коллектив лаборатории работал над созданием объективных биохимических маркеров зрелости и функциональности сперматозоидов.

    В ходе исследований сперматогенеза животных и человека учеными были сделаны следующие наблюдения и выводы:

    1. В созревании мужской гаметы принципиально важен синтез белков семейства hsp 70 (HspA 2 у мужчин). Опыты, проведенные в 1994-1999 годах на мышах, показали: нарушение hsp70-2 вызывает угнетение сперматогенеза и азооспермию (отсутствие образования сперматоцитов). Позже, в 2003 году, эксперименты проводились на сперме жеребца и человека и также подтвердили прямую зависимость зрелости сперматозоидов и фертильного потенциала мужчины от уровня HspA 2.
    2. Исследования 1998-2005 годов показали связь между олигозооспермией и частотностью изменений кариотипа.
    3. В ходе экспериментов 2004-2006 годов было доказано, что форма и размеры сперматоцита не являются показателями его зрелости, а следовательно отбор по морфологическому признаку не гарантирует ожидаемого результата ИКСИ. Визуально нормальные сперматоциты не исключает таких хромосомных нарушений, как дисомия и диплоидия. Следовательно, выбор мужских гамет по принципу “самая здоровая на вид” – ненадежный метод для селекции зрелых гаплоидных сперматозоидов.
    4. Связываемость сперматозоидов с гиалуронатом (HA) – определяющий критерий оценки фертильности и отбора спермы. Содержание этого фермента в сперматозоидах оказывает влияние на увеличение их скорости, сохранение долговременной подвижности и жизнеспособности как в свежем семени, так и криоконсервированном / размороженном.
    5. Низкая плотность спермы при олигозооспермии не играет определяющей роли при ПИКСИ-лечении; если доказана HA-связываемость сперматозоидов, не имеет значения сколько их в семени – 10 или 1000.

    Одновременно с изучением механизма сперматогенеза разрабатывалась технология, альтернативная визуальному методу тестирования зрелости спермы. Ограниченная прогнозируемость ИКСИ и целесообразность нового метода ПИКСИ были доказаны рядом клинических исследований:

    1. Результаты ЭКО/ИКСИ 2006 года продемонстрировали неэффективность оценки внешних атрибутов спермы (формы, размера). В лечении участвовало 106 пар; 28 из них были пролечены методом ИКСИ, в то время как 78 пар воспользовались программой ЭКО. Результаты оказались похожими: у 26 ИКСИ-пациенток процент оплодотворения составил 57%; у 78 ЭКО-пациенток – 51%; двух женщин не удалось оплодотворить. Показатели беременности также не отразили существенной разницы, так как составили 54% для ЭКО и 48% для ICSI.
    2. При отборе HA-связанных сперматозоидов, в отличие от несортированных в классическом ЭКО, частота хромосомной дисомии сокращается до 0,16 с 0,52%, диплоидии – до 0,09 с 0,51%, дисомии половой хромосомы – до 0,05 с 0,27% (сокращение в 4-5 раз).
    3. Результаты лечения при выборе HA-связываемых сперматозоидов не показали случаев неблагоприятного развития эмбриона. Так, в отчете за 2005 год были приведены данные о 18 беременностях с сопоставлением результатов PICSI с классическим ICSI: количество отобранных полноценных сперматозоидов: 84 / 18; коэффициент оплодотворения: 69,7 / 67,0 %; эмбрионы хорошего качества: 56,6 / 51,7 %; частота беременности: 45,3 / 33 %; выкидыши: 7 / 0 %; процент успешных родов: 46,5 / 39,0 %. В более позднем исследовании 2006 года с 26 пациентами соотношение показателей оплодотворения PICSI и результатов классического ICSI было примерно таким же: 66,6 / 61,1 %.

    Доктор Хусар запатентовал чашку PICSI после 20-летних исследований в 2006 году. Тогда же было получено от FDA разрешение на производство нового продукта. В продаже он появился через 2 года.

    Описание PICSI-процедуры

    Согласно стандартному протоколу ICSI, на начальной стадией лечения проводят индукцию суперовуляции. Далее следует пункция фолликулярной жидкости с последующей идентификацией созревших ооцитов.

    Одновременно мужская сперма поступает в лабораторию, где происходит важнейшая часть процедуры – биохимическая спермоселекция. Установление зрелости и готовности сперматоцитов к контакту с яйцеклеткой осуществляется следующим образом:

    1. На дно специальной емкости (она называется чашкой ПИКСИ) наносят несколько микроскопических гидратированных HA-капель (их местонахождение обозначают для удобства маркировочными отметками).
    2. Добавляют в чашку суспензию спермы и наблюдают за реакциями.
    3. Через 5 минут начинается склеивание с HA-каплями биохимически зрелых сперматозоидов. Их легко идентифицировать по интенсивно бьющимся хвостам и лишенной при этом прогрессивной мобильности.
    4. Самые активные 20-50 сперматозоидов, проявившие способность склеиваться с гиалуронатом и оказавшиеся в середине капель, отбирают специальной пипеткой.

    На этом процедура ПИКСИ завершается, уступая очередь манипуляциям классического ИКСИ:

  • селектированные сперматозоиды помещают в каплю PVP для инактивации хвостов и повторного тестирования морфологии и подвижности, после чего набирают в микроиглу для впрыскивания в ооциты;
  • оплодотворение яйцеклетки инкубируют на 3-5 суток с последующим переносом в матку.
  • Кому поможет PICSI

    Методика ПИКСИ чаще всего рекомендуется парам, в которых у партнеров-мужчин имеются следующие проблемы:

  • неудачные попытки оплодотворения при реализации ЭКО-программы;
  • проблемы с развитием эмбриона в предшествующих циклах ЭКО;
  • частые самопроизвольные аборты;
  • нарушенные морфология или мобильность сперматозоидов;
  • получение спермы методом TESA или MESA;
  • подозрение на хромосомную анеуплоидию;
  • повышенный уровень фрагментации ДНК сперматозоидов.
  • Однако эту методику можно использовать только при условии, что в эякуляте достаточно мобильных сперматозоидов.

    Преимущества и недостатки метода

    PICSI имитирует соединение зрелого конкурентоспособного сперматозоида с комплексом яйцеклетки во время естественного оплодотворения. Он сочетает в себе:

  • достоинства ИКСИ (высокую вероятность оплодотворения);
  • возможность выбора зрелой спермы на основе ее способности соединяться с гидрогелем гиалуроната.
  • В отличие от программы ЭКО+ИКСИ, ПИКСИ предусматривает анализ не только формы, но и содержимого сперматозоидов, гарантируя два важных параметра их качества:

  • фертильную состоятельность;
  • геномную целостность.
  • Клинические исследования доказали принципиальные отличия ИКСИ ПИКСИ:

  • увеличение шансов в лечении бесплодия с преимущественным мужским фактором (улучшение показателей беременности и уменьшение количества выкидышей ЭКО);
  • минимизация риска врожденных пороков развития у потомства.
  • Единственный “минус” этого метода – более высокая стоимость ПИКСИ по сравнению с классическим ИКСИ. Однако надо понимать, что такая цена объективно отражает ценность высокотехнологичной биомедицинской услуги. В данном случае речь идет о бесценной возможности стать папой при минимальных репродуктивных резервах организма.

    Отражение ICSI и PICSI на потомстве

    При оплодотворении с помощью ICSI велик риск участия недостаточно зрелых сперматозоидов. Отсюда вероятность проблем, связанных с хромосомными анеуплоидиями и фрагментацией цепочки ДНК.

    Изменение генокода снижает показатели беременности после зачатия с применением ICSI. Это очень важный фактор, поскольку от 3 % до 6 % населения в развитых странах пользуются услугой искусственного оплодотворения. Кроме того, вызывает обеспокоенность вопрос, не будут ли дети ИКСИ страдать от генетических отклонений.

    Революционное значение метода PICSI в том, что он позволяет поддерживать передачу отцовского генокода зиготе на традиционном эволюционном уровне. Это значит, что дети ПИКСИ будут иметь и передавать потомству гены без хромосомных аномалий. Это неоценимый вклад в глобальную проблему современной репродуктологии – предупреждение врожденных патологий.

    Заключение

    В то время как традиционно сперматозоиды выбираются для ИКСИ на основе их внешнего вида, PICSI осуществляет этот выбор на основе способности сперматозоидов к оплодотворению. ПИКСИ санкционирует участие в зачатии действительного пригодных для этой роли мужских гамет с нормальным кариотипом.

    Учитывая высокую долю установленных клинических беременностей и их сохранение в процессе гестации при дополнении терапевтической схемы ЭКО+ИКСИ методикой ПИКСИ, применение последней является рациональным и обоснованным.

    Внедрение в практику лечения ПИКСИ рекомендовано особенно в тех случаях, когда предыдущие попытки лечения ЭКО+ИКСИ оказывались безрезультатными или сопровождались репродуктивными потерями. Все это позволяет считать ПИКСИ – отзывы благодарных пациентов тому свидетельство – наиболее надежным способом выбора лучшей спермы для зачатия.

    Стоит отметить и еще один немаловажный аспект. Данный метод избавляет женщину от незавидной роли – нести в одиночку бремя бесплодности. Теперь мужчина-партнер сможет разделить ее участь. Зная ответ на мучительный вопрос “Как стать папой?”, он внесет свой отцовский вклад в успешность ЭКО-лечения.

    Ссылка на основную публикацию